精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）

·產(chǎn)品說明：

　　【品 名】

　　精子權(quán)威五聯(lián)檢：精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)

　　【試劑特點】無須特殊儀器，簡單、快速、準確。

　　【檢驗原理】

　　成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白，富含精氨酸和胱氨酸殘基；不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白，富含賴氨酸殘基。酸性條件下，苯胺藍與賴氨酸殘基結(jié)合生成紫藍色化合物，從而指示不成熟核蛋白的存在，而核蛋白成熟的精子則染成紅色。

　　【樣本要求】液化后的新鮮精液標本

　　【操作方法】

　　1.試劑的準備

　　1)洗滌工作液的配制：A液(10×濃縮洗滌液)以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

　　2)洗脫工作液的配制：D液(10×濃縮洗脫液)以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

　　2.樣本準備

　　1)新鮮精液標本置于37℃恒溫水浴箱中完全液化。

　　2)精子的洗滌及稀釋，方法如下：①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml，以一次性吸管反復吹打精子數(shù)次后，2000轉(zhuǎn)離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團；②在Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml，以一次性吸管反復吹打精子數(shù)次后，2000轉(zhuǎn)離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團；③再次重復②的操作，離心結(jié)束后，棄去上清液。④在Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml，混合精子懸液。

　　3.檢測步驟

　　1)取上述已制備好的精子懸液15μl，均勻涂布于防脫載玻片上，自然干燥。

　　2)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi)，滴加B液(固定液)2—3滴，室溫反應2min。

　　3)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子)，甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

　　4)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi)，滴加C液(染色液)2—4滴，室溫反應5min。

　　5)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子)，并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

　　6)將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應池中，使待測標本涂片區(qū)完全浸沒于洗脫工作液中，室溫反應5min。

　　7)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子)，并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

　　8)在涂片區(qū)內(nèi)滴加E液(復染液)2—4滴，室溫反應5min。

　　9)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度，以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子)，迅速吹干玻片。(如果需要長久保存該涂片樣本，可選擇完成以下脫水步驟：分別將組織片依次置于70%、90%和100%乙醇中各2min，晾干。)

　　10)鏡檢。

　　【染色結(jié)果】

　　核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍色或紫色，核蛋白成熟的精子染色呈紅色。

　　【參考值】DFI(單鏈DNA精子)＜10%為正常；當DFI＞25%時，受精率＜20%。

　　【注意事項】

　　1.受試者應按照WHO技術(shù)規(guī)范采集精液標本。

　　2.若精液標本粘稠度高或液化不完全，可導致檢測結(jié)果非特異性假陽性。需要預先降低精液粘度或促進精液完全液化后，才能用于檢測。

　　3.精子密度過高可能導致脫色不均勻，從而對檢測結(jié)果產(chǎn)生不良影響；精子密度過低則不會影響檢測結(jié)果；涂片時應避免涂布過于稠密。

　　4.精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結(jié)果。

　　5.染紫藍色精子為核蛋白不成熟精子，染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期，因此此類精子頭部呈淡藍色或紫色；精子頭部局部染淡藍色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍色，均是精子不夠成熟的表現(xiàn)。

　　6.鏡下觀察結(jié)果時，不要在精子堆集分布的區(qū)域計數(shù)，應選擇精子散在分布的區(qū)域進行計數(shù)。

　　7.受檢者所有樣品均應視為潛在的傳染源，檢測完畢的樣本、試劑均須作為醫(yī)療廢物處理，避免污染環(huán)境。

　　8.精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑，檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床管理應結(jié)合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應等情況結(jié)合考慮。

　　【基本信息】

　　存儲條件及有效期：試劑盒于2-8℃避光保存，有效期12個月。

• 聯(lián)系方式
• 生產(chǎn)企業(yè)：

  三明市和眾生物技術(shù)有限公司

• 聯(lián) 系 人：陳先生
• 聯(lián)系電話：0598-8297899
• 聯(lián)系我時，請說是在中國醫(yī)療器械網(wǎng)上看到的，謝謝！
• 手    機：
• 聯(lián)系傳真：0598-8297878
• 電子郵件：[email protected]
• 公司網(wǎng)址：http://www.fjhzsw.com
• 單位地址：福建省三明市梅列區(qū)高新技術(shù)創(chuàng)業(yè)服務中心
• 郵政編碼：365001